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手足口病患者樣本特異性核酸檢測分析

時間:2020-02-13 11:23作者:仲惟惟 尹曄
本文導讀:這是一篇關于手足口病患者樣本特異性核酸檢測分析的文章,手足口病是由多種人腸道病毒引起的一種兒童常見傳染病,大多數患者癥狀輕微,以發熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹為主要癥狀。

  摘    要: 目的 比較手足口病患者咽拭、糞便樣本中腸道病毒(EV)的檢出率,為手足口病監測樣本采集的選擇提供依據。方法 采集2013年間鞍山地區醫療機構臨床診斷手足口病患者63例咽拭、糞便配對標本。采用Real-time PCR法進行柯薩奇病毒A組16型(Cox A16)、腸道病毒71型(EV 71)、其他腸道病毒型檢測。結果 63例患者配對樣本中,Cox A16、EV 71、腸道病毒通用型咽拭子陽性率分別為26.98%、1.59%和26.98%,糞便陽性率分別為22.22%、1.59%和31.75%。結果顯示兩種樣本病毒核酸陽性率,差異無統計學意義(χ2=0.534,P>0.05)。兩種樣本檢測結果相關性,差異有統計學意義(χ2=8.036,P<0.05)。咽拭樣本和糞便配對樣本核酸檢測陽性率,差異無統計學意義(P>0.05)。結論 咽拭樣本和糞便樣本核酸檢測陽性率相同,可以采集咽拭樣本代替糞便標本。

  關鍵詞: 手足口病; 病原學; 腸道病毒;

  Abstract: Objective To compare the detection rate of enterovirus(EV)in swallow swab and fecal samples of patients with hand-foot-mouth disease, and to provide evidence for the monitoring sample selection of hand-foot-mouth disease. Method In 2013, 63 patients with hand-foot-mouth disease clinically diagnosed by medical institutions in Anshan district were collected and paired samples of pharyngeal swabs and feces were collected.Cox A16, EV 71 and other enter virus types were detected by real-time PCR. Results Among the 63 pairs of specimens, the positive rates of Cox A16,EV 71 and other Etiology in throat swabs were 26.98%, 1.59% and 31.75% respectively, and in excrements were 22.22%, 1.59% and 31.75%respectively. The results showed that the positive rate of viral nucleic acid in the two samples was not statistically significant(χ2=0.534,P>0.05). The correlation between the two samples was statistically significant(χ2=8.036,P<0.05). There was no significant difference in the positive rate of nucleic acid detection between the throat swab and the fecal paired sample(P>0.05). Conclusion The positive rate of nucleic acid detection in throat swab and fecal samples is the same, and throat swab samples can be taken instead of fecal specimens.

  Keyword: Hand-foot-mouth disease; Etiology; Enterovirus;

  手足口病是由多種人腸道病毒引起的一種兒童常見傳染病,大多數患者癥狀輕微,以發熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹為主要癥狀。少數患者可出現無菌性腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、神經源性肺水腫和心肌炎等,個別重癥患兒病情進展快,可導致死亡。本文通過Real-time PCR法對2013年鞍山地區63例手足口病患者的咽拭和糞便樣本進行特異性核酸檢測分析,為手足口病聚集性疫情、暴發疫情和常規監測樣本采集提供科學依據,現報告如下。

  1 、材料與方法

  1.1 、樣本來源

  采集2013年鞍山地區醫療機構臨床診斷為手足口病患者發病7天內的樣本,采集后4℃保存,送鞍山市疾控檢測,如果當天不能檢測,送-70℃保存待檢。共收集63例患者的咽拭子和糞便標本。年齡4~6歲,男28例,女35例。

  1.2、 試劑與儀器

  采用上海普洛麥格生物產品有限公司的promega EV 71、Cox A16、腸道通用病毒檢測試劑盒,使用BIO-RAD IQ5 Real-time PCR PCR檢測儀器。

  1.3 、檢測方法

  依據《手足口病預防控制指南》及試劑盒說明書,應用Real-time PCR法對柯薩奇病毒A組16型(Cox A16)、腸道病毒71型(EV 71)、其他腸道病毒進行檢測。
 

手足口病患者樣本特異性核酸檢測分析
 

  1.4 、統計學處理

  采用SPSS 16.0軟件進行統計分析,經χ2檢驗,以P<0.05為差異具有統計學意義。

  2、 結果

  2.1、 兩種樣本檢出率

  63例患者樣本中,Cox A16、EV 71、腸道病毒通用型咽拭子陽性率分別為26.98%(17/63)、1.59%(1/63)和26.98%(17/63),糞便陽性率分別為22.22%(14/63)、1.59%(1/63)和31.75%(20/63)。咽拭和糞便樣本病毒核酸陽性檢出率,差異無統計學意義(χ2=0.534,P>0.05)。

  2.2、 兩種樣本配對比較

  兩種樣本核酸檢測陽性率之間存在關聯,差異有統計學意義(χ2=8.036,P<0.05)。兩種樣本核酸檢測結果McNemar檢驗,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

  表1 兩種樣本病毒核酸檢測配對比較情況(例)
表1 兩種樣本病毒核酸檢測配對比較情況(例)

  3、 討論

  自2008年手足口病列入法定傳染病以來,在我國多地手足口病都有暴發流行[1,2,3]。針對聚集或者暴發疫情,及時采集檢測樣本為核實疫情提供有力依據。本次研究結果顯示,兩種樣本核酸檢測陽性率之間存在關聯,差異有統計學意義(P<0.05)。即糞便樣本核酸檢測是陽性,咽拭樣本核酸檢測也是陽性。兩種樣本核酸檢測結果,差異無統計學意義(P>0.05)。這表明,糞便樣本和咽拭樣本在用Real-time PCR法進行特異性核酸檢測分析時,陽性率接近。在發生聚集或爆發疫情時,為防止糞便樣本不能及時上送,可以采集咽拭樣本進行核酸檢測,以及時核實疫情。

  本次樣本收集依靠住院臨床醫生和疾控機構,不同采集者采集樣本存在差異。偏遠地區患者樣本當天不能檢測,監測結果存在差異。僅收集1年樣本進行分析,建議長期監測分析。

  參考文獻

  [1] 羅平編.飲料資料、飲料分析與檢驗[M].北京:中國輕工業出版社,1992:311-313.
  [2] 邰昌松,肖慧賢.用氣相色譜-質譜聯用技術分析鉤吻堿中毒[J].中國衛生檢驗雜志,1999,9(1):20.
  [3]Liu J,Wangs,Liu H,et al. The monitoring biomarker for immune of lymphocytes in the eidedy[J]. Mech Ageing Dev,1997,94(2):178.

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